农药残留快速检测仪根据国标gb/t5009.199-2003。采用连续检测法和酶抑制原理。在一定条件下,有机磷和氨基甲酸类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计测定412nm下吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。具体使用方法
1、开机
打开仪器背面电源开关,仪器显示开机画面,按画面提示操作,进行检测之前先校正仪器零点
2、试剂配制
2.1、缓冲液:取1包缓冲剂加入500ml蒸馏水或纯净水中,搅拌溶解制成磷酸缓冲液(ph7.6),常温保存。
2.2、显色剂:取1瓶显色剂加25ml缓冲液溶解,使用时取100μl,4℃冰箱保存。
2.3、底物:取1瓶底物加12.5ml蒸馏水或纯净水溶解,使用时取100μl,4℃冰箱保存;
或取1瓶底物加2.5ml蒸馏水或纯净水溶解,使用时取20μl,4℃冰箱保存。
2.4、胆碱酯酶:酶制剂无需配制,可直接取用,使用时取100μl,4℃
冰箱保存。
3、样品提取
取2g果蔬样品(块茎类取4g),叶菜剪成25px左右见方的碎片,块茎类取横截面样品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10ml缓冲液,振荡1~2min,倒出提取液,静置2min,待测。若提取液混浊或杂质太多可过滤后再测。
4、测试
4.1、对照测试:于反应瓶中加入2.5ml缓冲液,再分别加入100μl酶液和显色剂,混匀,静置反应10min后加入100μl(或20μl)底物,摇匀并立即倒入比色杯中,及时放入仪器的测量室通道中。按〈对照〉键,显示屏延迟设定秒数后,测量时间开始,计时完毕,显示屏显示对照吸光度增量(δα),并提示完成。在进行对照测试时,其他通道可同时进行样品测试。
4.2、样品测试:于反应瓶中加入2.5ml待测液,再分别加入100μl酶液和显色剂,混匀,静置反应10min后加入100μl(或20μl)底物,摇匀并立即倒入比色皿中,及时放入仪器的测量室通道。按〈样品〉键,显示屏下方延迟设定秒数后,测量时间开始,计时完毕,显示屏显示样品吸光度增量(δα)及抑制率,并提示合格或超标。数据可进行自动保存,如有需要按〈打印〉键打印。
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