1.酶标抗抗体作业浓度的挑选
(1)用100ng/ml人igg进行包被,洗刷。
(2)将酶标抗人igg用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗刷。
(3)加底物显色。加酸停止反响后,读取吸亮度(a),制作曲线如图15-10。读取a值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的作业浓度。该酶标抗人igg的作业浓度应为1/1600。
2.棋盘滴定法挑选包被抗原作业浓度
(1)用包被液将抗原作一系列稀释后进行包被,洗刷。
(2)将强阳性参阅血清、弱阳性参阅血清和阴性参阅血清用稀释液作1:100稀释,加样,保温,洗刷。
(3)加按作业浓度稀释的酶标抗人igg抗体,保温,洗刷。
(4)加底物显色。加酸停止反响后读取a值。
(5)挑选强阳性参阅血清的a值为0.8左右、阴性参阅血清的a值小于0.1的包被抗的的稀释度作为作业浓度。表15-1为本例的测定结果,表中数字为a值。从表中可见1:200为舒适的作业浓度。
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