微生物检测注意这些才能保证结果的准确性!
百欧博伟生物:在微生物检验操作过程中,要保证做样环境(如超净台、房间)以及所用工器具的洁净程度,同时保证人员各种操作的规范性,尽量保证其无菌性,防止因人为原因操作失误而出现误差结果,同时在适宜温度进行培养,为合理决策和指导生产提供依据。
为保证检测结果的准确性,我们应做好以下几个方面:
一、培养基的灭菌及使用
1.每次配置时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。
2.培养基配置时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。
3.一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。
4.灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效灭菌时间。
5.灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过3天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。
6.在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水域温度(先化好的可从水域取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。
7.做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。
8.每瓶培养基均要做空白。
9.尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。
10.培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。
二、做样环境的维持
(一)大环境(房间)
1.做样时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。
2.如果在原来的原料微生物检测室进行做样,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。
(二)小环境(超净台)
1.定期清洁初效过滤器,要及时更换。
2.做样前,将超净台内部进行清洁,用75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。
3.关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。
4.每次做样后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用75%酒精进行擦拭消毒。
5.紫外灯根据其使用寿命要及时更换。
6.做样同时,要做上相应菌落检测的环境空白。
7.做样区域的选择:
a、一般在距离超净台外沿的1/3-2/3区域进行无菌操作;
b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。
三、工器具的洁净度
1.玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。
2.做样用剪刀、勺子等物品要做到做样,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。
3.接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌,但要注意做样时要先将接种针(环)进行冷却。
四、样品的采集及检测
(一)保证采样器具的无菌性
1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,导致玻璃器皿易裂纹而报废)。
2)取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒
3)取样勺、浓奶取样提子:要保证其清洁消毒,清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。
4)取样袋:可现用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。
5)电子称表面用75%酒精消毒。
(二)人员操作
1.保证手部的清洗、消毒:取样前及做样前都要先洗手再消毒。
2.取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。
3.取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。
4.在要求的做样区域进行操作。
5.做样前,要用75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。
6.往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。
7.样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1ml吸管不允许将管口敲掉),进行100倍稀释时,1ml吸管要伸入盐水中,不可以将样品管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。
8.盐水温度以40℃左右为宜,不能过热,将部分微生物烫死,也不能温度太低,不能将奶粉溶解*。
9.进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。
10.倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中干掉,微生物亦死亡,以15ml左右为宜。
11.做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。
12.接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况发生,导致无法判断、确认。
13.做样完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。
五、微生物的培养
1.在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。
2.要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。
北京百欧博伟生物技术有限公司拥有biolog微生物鉴定系统,超低温冰箱,生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。
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