培养原代细胞是一项复杂的工作,其关键点包括以下几个方面:
细胞类型选择:不同类型的细胞需要不同的培养条件,因此首先需要明确要培养的细胞类型,例如动物细胞、植物细胞等。
培养基的配制:培养基是细胞生长所必需的营养物质和生长因子的混合物,需要按照特定的配方制备。不同类型的细胞需要不同的培养基,因此需要根据细胞类型选择适合的培养基,并严格按照配方制备。另外,血清也是一个重要因素。ausbian进口胎牛血清,内毒素含量低,品质稳定。
细胞培养条件的控制:细胞需要特定的生理和环境条件才能生长和分裂。因此需要控制培养箱中的温度、湿度、co2浓度、通气性等参数,以及培养皿的密闭性和材料的选择等因素,以提供适合的生长环境。
细胞的传代:细胞在培养基中生长和分裂,逐渐形成细胞层。为了保持细胞的生长状态和活性,需要及时将细胞移植到新的培养皿中进行传代,以维持细胞的生长和分裂。
消除细胞污染:在细胞培养过程中,细胞污染是常见的问题,如细菌、真菌、病毒等。因此需要采取适当的措施,如灭菌、消毒、过滤等,以避免细胞污染对细胞生长和实验结果的影响。
胎牛血清,是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。
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