分享有关质粒纯度不高解决办法
质粒纯度不高解决办法
1.混有蛋白：不要使用过多菌体。经溶液p1、p2、p3处理，离心后溶液应为澄清的，如果还混有微小蛋白悬浮物可再次离心去除后再进行下一步骤。
2. 混有rna：rnasea处理不干净，请减少菌体用量或加入溶液p3之后室温放置一段时间。如果溶液p1已保存6个月以上，请在溶液p1中添加rnasea。
3. 混有基因组dna：加入溶液p2和p3后应温和混匀，如果剧烈振荡，可能把基因组dna剪切成碎片从而混杂在质粒中。如果加入溶液p2后过于粘稠，无法温和混匀，请减少菌体用量。细菌培养时间过长会导致细胞和dna的降解，培养时间不要超过16小时。
4. p3溶液加入时间过长：p3溶液加入后，放置时间不要太长，否则有可能会产生小片段dna污染。
5. 含大量核酸酶的宿主菌：宿主菌含大量核酸酶，在质粒提取过程中降解质粒dna，影响提取质粒dna的完整性，/好选用不含核酸酶的大肠杆菌宿主菌。
6. 质粒的二聚体和多聚体形式：质粒复制过程中形成的，与宿主菌相关，电泳可检测出多条条带，单酶切处理后可变成单一条带。
以上是分享有关质粒纯度不高解决办法。上海通蔚生物科技有限公司将进一步加强人才培养、产品创新，持续不断地提升企业核心竟争力，实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的化大集团企业，更好、更快捷、更*的服务于生命科学领域，迎接新一轮世界经济一体化所带来的机遇与挑战。
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3. 混有基因组dna：加入溶液p2和p3后应温和混匀，如果剧烈振荡，可能把基因组dna剪切成碎片从而混杂在质粒中。如果加入溶液p2后过于粘稠，无法温和混匀，请减少菌体用量。细菌培养时间过长会导致细胞和dna的降解，培养时间不要超过16小时。
4. p3溶液加入时间过长：p3溶液加入后，放置时间不要太长，否则有可能会产生小片段dna污染。
5. 含大量核酸酶的宿主菌：宿主菌含大量核酸酶，在质粒提取过程中降解质粒dna，影响提取质粒dna的完整性，/好选用不含核酸酶的大肠杆菌宿主菌。
6. 质粒的二聚体和多聚体形式：质粒复制过程中形成的，与宿主菌相关，电泳可检测出多条条带，单酶切处理后可变成单一条带。
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