蛋白质电泳常用试剂配制方法
蛋白质电泳常用试剂配制方法如下：
一、3×sds-page loading buffer的配制
3×sds-page loading buffer 10ml
1m tris-hcl (ph 6.8) 1.5ml
sds 0.6g
bpb(溴酚蓝) 30mg
甘油（丙三醇） 3ml
去离子水 5.5ml
1、将除bpb以外的药品溶解。sds常温下很难溶解，可以在37℃水浴溶解。溶解后，再加入bpb，进行溶解；
2、把溶好的buffer分装到1.5ml的离心管中，1ml/管，常温放置；
3、使用前，每管加入30µl巯基乙醇。
注意事项：巯基乙醇为危险品，加入的过程在通风橱中完成，并且带好手套。
二、10×pbs的配制
0.1m pbs（10×pbs） 1l
nah2po4.2h2o 2.83g
nacl 85g
na2hpo4.12h2o 28.98g
1、用去离子水将以上药品进行溶解；（溶解的非常慢，可能需要过夜）
2、调ph值到7.2，用0.4µm的滤膜过滤。常温保存；
3、工作时用的是1×pbs。
三、1.5m tris-hcl (ph 8.8) 的配制
1.5m tris-hcl 250ml
tris 45.425g
1、用200ml去离子水将tris溶解。
2、用浓盐酸调ph值到8.8。
3、调好ph的tris-hcl定容到250ml。
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
注意事项：tris的缓冲能力很强，调ph值时，费些时间，但不要调过。
四、1m tris-hcl (ph 6.8) 的配制
1m tris-hcl 250ml
tris 30.275g
1、用200ml去离子水将tris溶解；
2、用浓盐酸调ph值到6.8；
3、调好ph的tris-hcl定容到250ml；
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
五、30%丙烯酰胺的配制
30%丙烯酰胺 250ml
丙烯酰胺 72.5 ml
bis甲叉丙烯酰胺 2.5 ml
1、把药品用去离子水溶解后定容到250ml；
2、用滤纸过滤，放在棕色瓶子中，4℃保存。
注意事项：两种药品有毒性，配制过程要带手套和口罩。
六、10%sds的配制
1．1g sds加入10ml去离子水进行溶解；
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
七、10%过硫酸铵的配制
1．1g 过硫酸铵加入10ml去离子水进行溶解。
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
八、5×sds-page电泳缓冲液的配制
5×sds-page电泳缓冲液 1l
tris 15.1g
glycine（甘氨酸） 94g
sds 5g
将以上药品用去离子水溶解后定容到1l，常温保存。工作时用的是1×sds-page电泳缓冲液。
九、考马斯亮蓝r-250染色液的配制
1、往1g考马斯亮蓝r-250中加入250ml异丙醇，在磁力搅拌器上搅拌六小时以上；
2、加入650ml去离子水，磁力搅拌器搅拌过夜；
3、再加入100ml冰醋酸进行溶解，磁力搅拌器搅拌；
4、在通风橱内用滤纸进行过滤。常温保存。染色液只能反复用两次。
注意事项：在磁力搅拌器上搅拌时，要把容器封口。
十、脱色液的配制
脱色液 1l
醋酸（冰乙酸） 100ml
乙醇（无水乙醇） 50ml
去离子水 850ml
常温保存。
苏州阿尔法实验器材有限公司14年专注于生物实验室仪器设备与实验耗材和生物试剂的专业供应商，迄今为止已服务1000+客户。主要经营的仪器类产品包括恒温振荡培养箱，二氧化碳摇床，全温振荡培养箱，振荡培养箱，rainin移液器，培养箱，霉菌培养箱，生物反应器，发酵罐，二氧化碳培养箱，液氮罐，超纯水机，天平，离心机、洁净工作台等。厂商企业授权包括知楚仪器、朗基、中科美菱，梅特勒，乐枫，搏旅、nest、天根、奥盛等80余家。另外还有细胞培养试剂、肿瘤细胞、天根试剂盒、碧云天试剂、阿拉丁试剂、过氧化氢消毒液、季铵盐消毒剂、复方季铵盐消毒液、杀孢子剂、醇类消毒液、浓缩消毒液、除霉菌消毒液、无尘布、洁净抹布、灭菌拖把等广泛应用于生命科学、医院、制药企业、医药研发、疾控防御、检验检疫等多种场景。
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2、把溶好的buffer分装到1.5ml的离心管中，1ml/管，常温放置；
3、使用前，每管加入30µl巯基乙醇。
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4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
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