江苏/北京 液相色谱仪的分析方法优化剖析:
1.要求标准:
确保分析系统的所有的分离组分达到规定要求(保证组分的重复性),在此基础上尽量缩短分析时间;
2.尊重原分析方法,用标准品测试分析方法;
3.用溶解样品的溶剂做空白,确定溶剂峰在色谱图上的出峰时间;
4.用配好的一定浓度的标准品进针,确定标准品峰在色谱图上的出峰时间。
a.如果标准品峰与溶剂峰重叠或者分离不好,则要调整流动相(例如,反相色谱系统需要增加水和缓冲液的比例,减少有机溶液的比例)或者选用长一些的色谱柱。
b.如果标准品峰在进针后很长时间没有出峰,就需要耐心等待出现标准品峰,只有出现标准品峰,才有可能去调整流动相(例如,反相色谱系统需要减少水和缓冲液的比例,增加有机溶液的比例)或者选用短一些的色谱柱。
5.对一些黏度比较大的流动相,则需要加装色谱柱柱温箱,以提高色
谱柱的温度,降低流动相的黏度,缩短保留时间。
6.如何降低梯度分析的基线噪声
大家都知道在做等度分析中流动相是配好平衡好的,基线噪声很小。而梯度分析则是水及水的缓冲液相与有机相在动态状态下进行混合和平衡的,再加上恒流泵的脉动因素使其基线噪声增大。从而降低了仪器的灵敏度。
以二元高压梯度为例:
将a泵以甲醇为流动相从90%变化到70%,b泵以水为流动相从10%变化到30%,进行梯度分析。改变为配成90%甲醇水溶液和70%甲醇水溶液,分别用a泵输送90%甲醇水溶液,用b泵输送70%甲醇水溶液,进行梯度分析。这样的混合方式可有效地降低基线噪声。
关键词:液相色谱仪 色谱柱 柱温箱
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