荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条、粉末)的光谱扫描。
荧光分光光度计的功能特点:
1. 荧光发射光谱
选择某一固定波长的光激发样品,记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系,即得荧光发射光谱。
2. 荧光激发光谱
选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱。
3.时间分辨技术;
可用于对混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。
时间分辨荧光测定公式如下:
p(t) = p0 exp (-t /τ)
式中p(t):拟合指数函数
p0:强度取值
exp:指数运算符
t:时间取值
τ:荧光平均时间寿命
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