人Tuberculin elisa试剂盒操作流程
人tuberculin elisa试剂盒操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差（w1-w2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（s）和阴性对照（n）的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
aesgp130结合蛋白gam抗体
amhr2缪勒激素2型受体抗体
actr1激活素受体1a抗体
actr2激活素受体2a抗体
activin receptor type iib激活素受体2b抗体
c2orf88 2号染色体开放阅读框88抗体
arhgef18g蛋白偶联受体arhgef18抗体
activin a receptor type ib激活素受体1b抗体
ara24雄激素受体相关蛋白24抗体
amyloid precursor protein淀粉样肽前体蛋白抗体（c端）
adcy2腺苷酸环化酶2抗体
apoc3载脂蛋白c3抗体
apolipoprotein e4载脂蛋白e4抗体
ambra1自噬相关基因ambra1抗体
phospho-atg4c(ser177)磷酸化自噬相关蛋白4c抗体
phospho-atg4c(ser398)磷酸化自噬相关蛋白4c抗体
phospho-ask1 (ser966)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-atxn1 (ser775)磷酸化失调症蛋白1抗体
atxn1/ataxin-1脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-amyloid precursor protein (thr668)磷酸化app淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ask1 (ser967)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ask1 (thr845)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-atf2 (thr69/71)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-atp1a1 (tyr10)磷酸化钠钾atp酶蛋白a1抗体
phospho-atp1a1 (ser16)磷酸化钠钾atp酶蛋白a1抗体
phospho-ack1 (tyr859 + 860)磷酸化ack1抗体
phospho-ampk alpha-1(ser485+ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-ampk beta 1 (ser108)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
关键词：培养箱
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（4）阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
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