1 、高压泵
hplc使用的色谱柱是很细的(1~6mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、高效分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
2 、梯度洗提
类似于gc中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不能少的部分。
梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。
3 、进样装置
(1)注射器进样装置:进样所用微量注射器及进样方式与gc法一样。进样压力<150×105pa,当进样压力>150×105pa时,必须采用停流进样。
(2)高压定量进样阀:与gc法用的流通法相似,能在高压下进样。
4、色谱柱
色谱柱是色谱仪最重要的部件(心脏)。通常用后壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的,对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时,可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。
柱子内径一般为1~6mm。常用的标准柱型是内径为4.6或3.9mm ,长度为15~30cm的直形不锈钢柱。填料颗粒度5~10μm ,柱效以理论塔板数计大约7000~10000 。
发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
5、检测器
主要包括紫外光度检测器、光电二极管阵列检测器、荧光检测器、差示折光检测器和电导检测器。
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