新生牛血清是细胞大规模培养用于生产疫苗、生物药及病毒载体的重要原材料,也是细胞学实验常用的天然培养基。它的质量好坏对细胞形态及生长情况的影响很大,尤其是要保证其无微生物的污染,因为微生物对细胞的污染会造成实验结果的偏差,对生物制品的安全性也构成威胁。国内外的相关部门都提出了一系列的质量检测指标。但也有人指出其不足,如对外源微生物的检测项目较少、不能涵盖所有微生物的检测;检测度也受到方法本身的限制而不能达到很高的水平。为此, 建立快速、、广谱的新生牛血清外源因子检测方法是非常必要的。
有生物制品机构开发出电镜监测微生物的方法。其主要采取的是膜表面富积法来制备电镜样品。将有膜电镜载网放入装有新生牛血清的离心管中, 5000 rpmin 离心, 然后取出载网负染。同时设立实验组和对照组。对于细菌,设置电镜放大1万倍,观察时间为 30分钟, 当5 分钟内检出细菌记为/ + + + , 10分钟检出细菌记为/ + + , 30 分钟内检出记为/ +。对于病毒,设置电镜放大3万倍,借助目镜观测, 5分钟内检出 n种记为/ n+ + +,10分钟内检出记为/ n+ +,30分钟内检出记为/ n+。研究人员选择了三种国内外不同新生牛血清的牌子,每个牌子的血清又选择了3-10个批次。结果显示,用培养基进行无菌检测时,大部分做的比较好,只有一个牌子的一个批次出现细菌检测阳性,其余皆阴性。但用电镜检查时,对照组皆为阴性,但实验组的大部分都是阳性(阳性率高达95.6%)。病毒的阳性率为34.8%。具体病毒的部分检测图像如下:
在方法上,作者认为,与膜表面富积法制备的新生牛血清电镜样品相比, 常规负染法只能获得极少的观测视野, 且附着粒子极少。而膜表面富积法所制样品可以在每个网孔取得观测视野,粒子附着率应提高104~105倍。该方法只要求血清中的微生物数量, 不要求微生物的颗粒密度,这样即使在微生物密度极低的情况下, 也能有效利用电镜进行有效检测。
作者认为,对于污染程度极低的血清, 要经过多个数量级的放大后才能在细胞
培养中体现出来。而采用针对性强的病毒检测方法不能保证血清*避免病毒污染。因此,新生牛血清生产企业应不断改进生产和检测工艺, 提高产品的质量, 满足使用单位不断提高的质量要求。
ausbian精制新生牛血清系新西兰血源,澳洲生产,出厂前经严格质控,符合各项标准。血清经过0.22微米过滤和15kgy的gamma射线照射灭能,可杀灭细菌、支原体,无微生物风险,可满足广大用户对新生牛血清的品质需求。
品名:ausbian精制新生牛血清
货号:vs500n
批号:1712a
规格:500ml/瓶
市场价:1600元
欢乐价:800元
*活动:买10瓶送3瓶,100瓶送40瓶
参考文献
中国生物制品学杂志2004 年9 月第 17 卷第 5 期
新生牛血清中微生物的电镜检测及结果分析
作者:刘建华 梁 本 王殿军 郑晓丽 蓝志金 周丽微
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