大多数细胞适宜的ph为7.0~7.4,偏离此范围可能对细胞生长产生有害的影响。但各种细胞对ph的要求也不*相同,原代培养的细胞一般对ph变动耐受力差,无限细胞系耐受力强。细胞培养过程中ph值下降产生的原因有很多。在细胞生长非常快时,ph值通常下降得很快,此时可以通过及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外,培养瓶盖拧得过紧、nahco3缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或真菌污染等也能导致ph值通常下降得很快。这时,可以通过以下几种方法解决:
1、增加培养液中nahco3浓度或减少培养箱内co2浓度。nahco3含量在2.0 g/l到3.7 g/l之间时对应的co2浓度为5~10%;
2、 改用不依赖co2培养液;
3、 适当松开瓶盖。在培养液中加hepes缓冲液,使终浓度为10~25 mm;
4、在co2培养环境中改用基于earle's盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用hanks'盐配制的培养液;
5、 如果是污染造成的则丢弃培养物或用抗生素除菌。
关键词:培养箱
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